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PCR实验室规划建设方案要点

2021-01-17 09:58:00 icuic 35

PCR实验室规划建设方案要点
1.实验室空调通风系统设计及压力控制:PCR实验室并没有严格的净化要求,但是为避免各个实验区域间交叉污染的可能性,宜采用全送全排的气流组织形式。同时,要严格控制送、排风的比例以保证各实验区的压力要求。
2.污染的预防与控制:PCR实验室设计的核心问题是如何避免污染。在实际工作中,常见的有以下几种污染类型:扩增产物的污染;天然基因组DNA的污染;试剂的污染以及标本间的污染。由于一旦发生污染,实验就必须停止,直到找到污染源为止,而且实验结果必须作废,需重新进行实验。所以发生污染后再围绕实验室来寻找污染源不但耗时而且繁琐,浪费人力物力。因此要避免污染,首先应是预防,而不是排除。
3. 试剂配制室及样品处理室宜呈微正压,以防外界含核酸气溶胶的空气进入,造成污染;可以通过控制进风风量大于排风风量达到正压效果。
4. 核酸扩增室及产物分析室应呈微负压,以防含核酸的气溶胶扩散出去污染试剂与样品,可以通过控制排风风量大于进风风量达到负压效果。
5. 在理想情况下,PCR实验室缓冲间内,可设置正压,使室内空气不流向室外,室外空气不流向室内。 PCR实验室进风由原有中央空调控制,要求将中央空调风口安装到指定定点,且高度为地面铺装好后2600mm处。
6. 如果使用荧光PCR仪,扩增室和产物分析室可以合并。若房间进深允许,可设PCR内部专用走廊。需要指出的是在减少室内外空气交换方面,缓冲间比专用走廊更有意义。
7. 各个区域之间应具备单向的实验工艺流、物流、人流与气流,形成单向流程的保护屏障,避免实验之间的相互干扰,防止核酸气溶胶对实验过程造成污染产生假性结果。
8. 实验室的墙体,包括顶棚,应结构牢固、气密性好;所有阴角宜采用圆弧形线条过渡;墙体内壁光洁、不吸附、耐腐蚀、易清洗消毒;地面材料应满足无缝隙、无渗漏、光洁、耐腐蚀的要求。

PCR实验室分区布局
试剂准备区:扩增试剂的制备、包装和贮存
样品处理区:样品注册、子包;核酸提取、保存和加载
扩增产物分析区:扩增产物的测定、结果分析、注册和报告
预扩增区和后扩增区应严格分开,并且必须使用不同的房间,最好在两个区域之间有一定的间隔。
使用商业试剂盒在样品处理区域中制备小试剂
样品处理区域和试剂制备区域可以位于同一房间,只要满足以下操作和清洁要求:
在生物安全柜中操作;
每个实验者、实验组使用各自的试剂和消耗品;
将含有污染物的容器密封并使用一次;
实验前后对操作区域和共用设备进行有效清洁和消毒。

PCR实验室建设规划要点
1、主要结构:
主体是彩钢板、铝合金型材。房间的所有内角、正角均由铝合金50圆形铝制成,这解决了容易污染的问题、灰尘、难以清洁等问题。结构牢固,线条简洁,外形美观,密封性好。
2、标准三区分离和气压调节:
PCR过程分为试剂制剂。在三个独立的实验区中进行、样品制备和PCR扩增测定。整个地区都有一个整体缓冲走廊。每个独立的实验区都设有一个缓冲区,每个区域都受气压调节,从而在整个PCR实验过程中保护试剂和标本免受气溶胶污染,减少了对人和环境的扩增产物的污染。
缓冲器I可以打开,缓冲器II的排气扇和PCR放大区域在外面排出,可调节风量的出风口安装在实验区和每扇门的外壁上,空气通风在室内通过回风口。。
3、消毒:
紫外灯安装在三个实验区域和三个缓冲区的顶部,并在传输窗口内进行消毒。
在试剂制备区域和样品制备区域中还提供移动的紫外灯,以对实验台进行部分消毒。
4、机械链不锈钢传递窗:
试剂和样品通过机械互锁不锈钢(不建议用于电子联锁)进行交付,以确保试剂和样品在转移过程中不被污染(个人分流)
5、地面
建议使用PVC盘绕地板或自流动地板以获得良好的地面。易于清洁和耐腐蚀。水磨石地板也可以无条件地使用,或者大块瓷砖(至少800 mm x 800 mm)接缝需要小于2 mm。
6、照明
灯具应清洁光滑,可达到易于清洁的特点、无尘。

注意施工过程
●标准化的安装流程和全面的服务流程
●严格遵循科学设计的安装流程。
●安装前,需要确定以下安装条件,如:电源电压,电源线位置,电话网线入口位置,进水压力,最小安装空间,地面,通风孔、进水管和下水管位置等。理想的空间大小和通风口的大小。
PCR实验室设计要点
PCR实验室可以是分散形式或组合形式。完成一组PCR实验,通常通过试剂制备、样品处理、核酸扩增和产物分析四个实验步骤,如果实验过程需要,还应增加样品破碎过程。
一个、分散形成PCR实验室
所谓的分布式PCR实验室是指完成上述实验过程的实验室彼此相距很远并且处于分布式排列。对于这种类型的PCR实验室,不需要特殊条件,因为实验不容易相互干扰。
两个、组合形成PCR实验室
所谓组合形式PCR实验室是指完成PCR的四个实验过程的实验室彼此相邻排列以形成独立实验区域的形式。对于组合式PCR实验室,由于每个实验的集中安排,容易引起相互干扰,因此对整体布局和屏障系统有一定的要求。每个舱室在入口处设有缓冲室,以减少室内和室外空气交换。
PCR实验室不可忽视的几点设计
1、实验室空调通风系统设计和压力控制
PCR实验室没有严格的纯化要求,但为了避免各个实验区域之间存在交叉污染的可能性,建议使用全流量全流量气流组织。同时,要严格控制排气的比例为、,以保证每个实验区的压力要求。
2、预防和控制污染
PCR实验室设计的核心问题是如何避免污染。在实践中,以下类型的污染是常见的:扩增产物的污染;天然基因组DNA的污染;试剂污染和试样之间的污染。由于污染发生,必须停止实验直到找到污染源,并且必须丢弃实验结果并且需要重复实验。因此,在污染发生后,在实验室周围浪费寻找污染源不仅浪费时间和麻烦,而且浪费人力和资源。因此,为避免污染,应首先进行预防,而不是排除。
3、PCR实验室必不可少的严格管理
(1)严格控制进出实验室的人员。与实验无关的人员不得随意进入或离开实验室,必要时设置进出整个实验区的独立通道和门;
(2)尽量减少实验区域内不必要的移动,以减少交叉污染的可能性
(3)扩增产物分析区是扩增产物污染的最重要来源。废液不能倾倒在实验室中。必须将其浸入消毒剂溶液中并丢弃在远离实验室的地方。使用过的尖端是一次性的。材料也应在消毒液中浸泡和消毒处理,如焚烧;
(4)扩增产物分析区可能存在一些基因突变和有毒物质,应特别注意实验人员的安全防护。
3.完整的实验室配套设施完整的实验室配套设施是确保实验工作的必要条件。设备和仪器应根据每个实验室的实验内容配备,如超洁净工作台、离心机、取样器等。

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